Предобработка данных

Анализ дифференциальной экспрессии с помощью limma в R

John Blischak

Instructor

Механизм кардиотоксичности доксорубицина

  • Схема 2×2 для изучения механизма действия доксорубицина:
    • 2 генотипа: дикий тип (wt), нокаут Top2b (top2b)
    • 2 варианта воздействия: PBS (pbs), доксорубицин (dox)
    • Zhang et al. 2012
dim(eset)
Features  Samples 
   29532       12
table(pData(eset)[, c("genotype", "treatment")])
        treatment
genotype dox pbs
   top2b   3   3
   wt      3   3
Анализ дифференциальной экспрессии с помощью limma в R

Исследование признаков

plotDensities(eset, 
    group = pData(eset)[, "genotype"], 
    legend = "topright")

Анализ дифференциальной экспрессии с помощью limma в R

Шаги предобработки

  • Логарифмическое преобразование

  • Квантильная нормализация

  • Фильтрация

Анализ дифференциальной экспрессии с помощью limma в R

Проверка: боксплот Top2b

boxplot(<y-axis> ~ <x-axis>, main = "<title>")
boxplot(<gene expression> ~ <phenotype>, main = "<feature>")
boxplot(<Top2b expression> ~ <genotype>, main = "<Top2b info>")
Анализ дифференциальной экспрессии с помощью limma в R

Анализ источников вариации

  • Анализ главных компонент

  • Функция limma plotMDS

  • Сколько кластеров вы ожидаете увидеть?

Анализ дифференциальной экспрессии с помощью limma в R

Давайте потренируемся!

Анализ дифференциальной экспрессии с помощью limma в R

Preparing Video For Download...