Modèle DESeq2

RNA-Seq avec Bioconductor dans R

Mary Piper

Bioinformatics Consultant and Trainer

Modèle DESeq2

Théorie DE

RNA-Seq avec Bioconductor dans R

Modèle DESeq2 - relation moyenne-variance

# Syntax for apply()
apply(data, rows/columns, function_to_apply)
# Calculating mean for each gene (each row)
mean_counts <- apply(wt_rawcounts[, 1:3], 1, mean)
# Calculating variance for each gene (each row)
variance_counts <- apply(wt_rawcounts[, 1:3], 1, var)
RNA-Seq avec Bioconductor dans R

Modèle DESeq2 - dispersion

Tracer la relation entre moyenne et variance :

# Creating data frame with mean and variance for every gene
df <- data.frame(mean_counts, variance_counts)
ggplot(df) +
        geom_point(aes(x=mean_counts, y=variance_counts)) + 
        scale_y_log10() +
        scale_x_log10() +
        xlab("Mean counts per gene") +
        ylab("Variance per gene")
RNA-Seq avec Bioconductor dans R

Modèle DESeq2 - dispersion

relation moyenne-variance

RNA-Seq avec Bioconductor dans R

Modèle DESeq2 - dispersion

$Var$ : variance

$\mu$ : moyenne

$\alpha$ : dispersion

Formule de dispersion : $Var = \mu + \alpha * \mu^{2}$

Relation entre moyenne, variance et dispersion :

$$\uparrow variance \Rightarrow \uparrow dispersion$$

$$\uparrow mean \Rightarrow \downarrow dispersion$$

RNA-Seq avec Bioconductor dans R

Modèle DESeq2 - dispersion

# Plot dispersion estimates
plotDispEsts(dds_wt)

Graphique de dispersion

RNA-Seq avec Bioconductor dans R

Modèle DESeq2 - dispersion

mauvais graphiques de dispersion

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Passons à la pratique !

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