Kvalitetsbedömning av flera sekvenser parallellt

Introduktion till Bioconductor i R

Paula Andrea Martinez, PhD.

Data Scientist

Rqc

library(Rqc)
  • Använder Bioconductor-paket som du redan känner till:
    • Biostrings, IRanges, methods, S4vectors
  • Nya paket att utforska i kommande Bioconductor-kurser:
    • Rsamtools, GenomicAlignments, GenomicFiles, BiocParallel
  • CRAN-paket:
    • Knitr, dplyr, markdown, ggplot2, digest, shiny och Rcpp
Introduktion till Bioconductor i R

rqcQA

library(Rqc)
files <- # ange den fullständiga sökvägen till filerna du vill analysera
qaRqc <- rqcQA(files) 

# utforska qaRqc class(qaRqc) # "list" names(qaRqc) # namn på indatafilerna
# för varje fil qaRqc[1] # resultatet har klassen RqcResultSet
Introduktion till Bioconductor i R

Argument för rqcQA

library(Rqc)

# ange sökvägen till filerna du vill analysera
files <- "data/seq1.fq" "data/seq2.fq" "data/seq3.fq" "data/se4.fq"

qaRqc <- rqcQA(files, workers = 4)

# urval av sekvenser set.seed(1111) qaRqc_sample <- rqcQA(files, workers = 4, sample = TRUE, n = 500))
# parade endefiler pfiles <- "data/seq_11.fq" "data/seq1_2.fq" "data/seq2_1.fq" "data/seq2_2.fq" qaRqc_paired <- rqcQA(pfiles, workers = 4, pair = c(1, 1, 2, 2)))
Introduktion till Bioconductor i R

rqcReport och rqcResultSet

# skapa en rapport
reportFile <- rqcReport(qaRqc, templateFile = "myReport.Rmd")

browseURL(reportFile)
# klassen för qaRqc är rqcResultSet methods(class = "RqcResultSet")
Introduktion till Bioconductor i R

perFileInformation

qaRqc <- rqcQA(files, workers = 4)) 
perFileInformation(qaRqc)
filename          pair format  group  reads total.reads   path 
SRR7760274.fastq  1    FASTQ    None  1e+06     2404795 ./data
SRR7760275.fastq  2    FASTQ    None  1e+06     1508139 ./data
SRR7760276.fastq  3    FASTQ    None  1e+06     1950463 ./data
SRR7760277.fastq  4    FASTQ    None  1e+06     2629588 ./data
Introduktion till Bioconductor i R

Plotfunktioner

rqc-plotfunktioner rqc-plotfunktioner
rqcCycleAverageQualityPcaPlot() rqcGroupCycleAverageQualityPlot()
rqcCycleAverageQualityPlot() rqcReadQualityBoxPlot()
rqcCycleBaseCallsLinePlot() rqcReadQualityPlot()
rqcCycleBaseCallsPlot() rqcReadWidthPlot()
rqcCycleGCPlot() rqcReadFrequencyPlot()
rqcCycleQualityBoxPlot() rqcCycleQualityPlot()
Introduktion till Bioconductor i R

cykel-basanrops-linjediagram

Introduktion till Bioconductor i R

KEEP CALM

Introduktion till Bioconductor i R

Du är redo!

Introduktion till Bioconductor i R

Preparing Video For Download...