Organisera data för DESeq2

RNA-Seq med Bioconductor i R

Mary Piper

Bioinformatics Consultant and Trainer

Importera data till DESeq2: provordning

Metadata meta_unordered

Råräkningarcounts_ordered

RNA-Seq med Bioconductor i R

Importera data till DESeq2: provordning

rownames(wt_metadata)
 [1] "wt_normal3"  "smoc2_fibrosis2" "wt_fibrosis3"  "smoc2_fibrosis3" "smoc2_normal3"   "wt_normal1"     
 [7] "smoc2_normal4"  "wt_fibrosis2"  "wt_normal2"  "smoc2_normal1"  "smoc2_fibrosis1" "smoc2_fibrosis4"
[13] "wt_fibrosis4"  "wt_fibrosis1" 
colnames(wt_rawcounts)
 [1] "wt_normal1"  "wt_normal2"  "wt_normal3"  "wt_fibrosis1"   "wt_fibrosis2"    "wt_fibrosis3"   
 [7] "wt_fibrosis4"  "smoc2_normal1"  "smoc2_normal3"  "smoc2_normal4"   "smoc2_fibrosis1" "smoc2_fibrosis2"
[13] "smoc2_fibrosis3" "smoc2_fibrosis4"
RNA-Seq med Bioconductor i R

Importera data till DESeq2: provordning

all(rownames(wt_metadata) == colnames(wt_rawcounts))
FALSE 
RNA-Seq med Bioconductor i R

Matcha ordning mellan vektorer

Använd funktionen match():

match(vector1, vector2)

vector1: vektor med den önskade ordningen

vector2: vektor med värden att ordna om

output: index som anger hur vector2 ska ordnas om för att matcha vector1

match(colnames(wt_rawcounts), rownames(wt_metadata)
6   9   1   14  8   3   13  10  5   7   11  2   4   12
RNA-Seq med Bioconductor i R

Ordna om med hjälp av match()-utdata:

idx <- match(colnames(wt_rawcounts), rownames(wt_metadata))

reordered_wt_metadata <- wt_metadata[idx, ]
View(reordered_wt_metadata)

Omordnad metadata

RNA-Seq med Bioconductor i R
all(rownames(reordered_wt_metadata) == colnames(wt_rawcounts))
TRUE

Omordnad metadata

 

Ordnade räkningar

RNA-Seq med Bioconductor i R

Skapa DESeq2-objektet

# Create DESeq object
dds_wt <- DESeqDataSetFromMatrix(countData = wt_rawcounts,
                              colData = reordered_wt_metadata,
                              design = ~ condition)

deseq object

RNA-Seq med Bioconductor i R

Nu kör vi en övning!

RNA-Seq med Bioconductor i R

Preparing Video For Download...